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高保真性的RT-PCR合成cDNA试剂盒

包装规格 50 次	单位支
技术规格 50 次	品牌 TaKaRa / TaKaRa
分类工具酶·分子生物学

高保真性的RT-PCR合成cDNA试剂盒

￥1392

高信货号

R022A

包装规格

50 次 / 支

技术规格

50 次

品牌

TaKaRa / TaKaRa

分类

工具酶·分子生物学

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■ 制品内容 (Code No.: R022A : 50 次量^*1)

PrimeScript RTase (for2 step)	25μl
5×PrimeScript Buffer	200μl
RNase Inhibitor (40 U/μl)	25μl
dNTP Mixture (10 mM each)	50μl
Oligo dT Primer (2.5 μM)	50μl
Random 6 mers (20 μM)	50μl
PrimeSTAR Max Premix (2×)	625μl × 2
Control F-1 Primer^*2 (20 μM)	10μl
Control R-1 Primer^*3 (20 μM)	10μl
Positive Control RNA (2×10⁵ copies/μl)	20μl
RNase Free dH2O	1 ml

1 反转录反应20 μl、PCR反应50 μl，2 Step RT-PCR时可使用50次。 2 Positive Control RNA用上游引物。 *3 Positive Control RNA用下游引物。

Limited Use Label License: [M54]

■ 制品说明

PCR (Polymerase ChainReaction；聚合酶链式反应) 是一种体外扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后进行扩增 (RT-PCR)，PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript HighFidelity RT-PCR Kit是一种对Total RNA及mRNA合成cDNA时具有高保真性的RT-PCR用试剂盒。
本试剂盒中使用的反转录酶是Takara改良的M-MLV新型反转录酶PrimeScript RTase，PCR时使用了对cDNA扩增时具有很高保真性的DNA聚合酶PrimeSTAR MAX DNA Polymerase。因PrimeSTAR MAX是兼具高保真性与高扩增效率的预混型酶，模板浓度适用范围广，可用于高保真性的cDNA克隆等重要反应中。
2 Step RT-PCR作为本试剂盒的标准操作流程，2 Step RT-PCR操作流程具有以下优点:
1.能够高效率地获得高保真性的RT-PCR扩增产物。
2.在42℃条件下反转录反应也可以使具有复杂结构的RNA进行良好的延伸。
3.反应体系中Total RNA的使用范围非常宽广，便于使用。
本试剂盒含有反转录反应及PCR扩增反应所需要的全部试剂。并且，也可以进行1 Step RT-PCR反应。

■ 保存

-20℃。
注意：PrimeSTAR MAX Premix (2×) 反复冻融25次后，已确认其活性没有发生改变，但要注意尽量避免冻融次数过多。

■ 试剂盒特点

使用2 StepRT-PCR标准操作流程时

RNA模板	适用于所有RNA
扩增片段大小	6 kb产物
反转录酶	PrimeScript RTase (反应温度在42℃)
DNA Polymerase	PrimeSTAR Max DNAPolymerase (2×premix)
RNase Inhibitor	必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物	Random 6 mers、Oligo dT Primer、特异性下游引物可供选择

使用1 Step RT-PCR操作流程时

RNA模板	适用于所有RNA
扩增片段大小	6 kb产物
反转录酶	PrimeScript RTase (反应温度50℃)
DNA Polymerase	PrimeSTAR Max DNAPolymerase (2×premix)
RNase Inhibitor	必须使用 (Kit中含有)
1st strand cDNA合成用引物	使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物) (不可使用Random6 mers及Oligo dT Primer)
操作	在同一个反应管中可连续进行RT-PCR反应

PrimeScript^™HighFidelityRT-PCRKit
品牌	CodeNo.	产品名称	包装量
Takara	R022A	PrimeScript^™HighFidelityRT-PCRKit	50次
Takara	R022B(A×4)	PrimeScript^™HighFidelityRT-PCRKit	200次