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E.coli CJ236 感受态细胞

包装规格 1 Set (100 μl × 10支)	单位支
技术规格 1 Set (100 μl × 10支)	品牌 TaKaRa / TaKaRa
分类克隆试剂

E.coli CJ236 感受态细胞

￥2110

高信货号

9053

包装规格

1 Set (100 μl × 10支) / 支

技术规格

1 Set (100 μl × 10支)

品牌

TaKaRa / TaKaRa

分类

克隆试剂

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■ 制品内容
E.coli CJ236 Competent Cells	100 μl × 10
pUC119 plasmid ( 0.1 ng/μl)	10μl × 1
SOC Medium^*	1 ml × 10

*SOC Medium: 2%		Tryptone
0.5%		Yeast extract
10 mM		NaCl
2.5 mM		KCl
10 mM		MgSO4
10 mM		MgCl2
20 mM		Glucose

■ 制品说明

Takara公司在Hanahan's method基础上进行了改良，制备出E.coli CJ236 Competent Cells，当1 ng pUC119转化100 μl 细胞时，转化效率可达1×10⁷ cfu/μg。
E. coli CJ236 Competent Cells适用于制备含有dU的ssDNA。通过CJ236转化后富集的ssDNA，可用于Kunkel法进行定点突变。

■ 细胞浓度

1 - 2×10⁹ Bacteria/ml

■ Genotype

E. coli CJ236 : dut1, ung1, thi-1, recA1 / pCJ105 (F' cam^r)

■ 保存

-80℃。
注意：如果不在-80℃下保存，转化效率将会降低。此时，在使用前，请使用附带的pUC119对照质粒来验证细胞的转化效率。不能液氮保存。

■ 转化效率

转入1 ng 的pUC119，涂于含有Amp⁺ 的选择培养基进行筛选。
转化效率 : >1 x 10⁷ cfu/μg pUC119

■ 注意事项

1.将感受态细胞从-80℃冷冻取出后请立即置于干冰/乙醇中。使用前保存于干冰/乙醇中。

2. 可使用microcentrifuge tubes代替Falcon tubes (CORNING #352059或352057)，但效率可能会降低。

3. 当使用100 μl感受态细胞时，加入不超过10ng的高纯度DNA样品。否则转化效率会降低。

4. 当改变感受态细胞数量或tubes类型时，适当调整反应条件。例如，当使用microcentrifugetubes时，42℃放置60秒。

5. L-broth 或φb-broth可替代SOC培养基。此时，转化效率可能会降低。

·L-broth :	Ingredient	per liter water
	Tryptone	10 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5并高压灭菌。
·φ b-broth:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	20 g
	Yeast extract	5 g
	MgSO4·7H2O	5 g
用1 N KOH调整pH到7.5并高压灭菌。

6. 稀释时使用SOC培养基。

7. 建议在选择培养基中加入 Chloramphenicol (30 μg/ml) 以保证F' 质粒稳定。

8. YT soft agar:	Ingredient	per 100 ml water
	Tryptone	0.8 g
	Yeast extract	0.5 g
	NaCl	0.5 g
用1 N NaOH调整pH到7.6，加入agar至浓度为0.6%，并高压灭菌。
9. YT-plate:	Ingredient	per liter water
	Tryptone	8 g
	Yeast extract	5 g
	NaCl	5 g
用1 N NaOH调整pH到7.5，加入agar至浓度为1.5%，并高压灭菌。

10. 制备感受态细胞。

11. 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。但是，如果再次冻结不可避免，将细胞置于干冰/乙醇中迅速冷冻，置于-80℃保存。但是，转化效率可能会降低至少一个数量级。

E.coliCJ236CompetentCells
品牌	CodeNo.	产品名称	包装量
Takara	9053	E.coliCJ236CompetentCells	1Set(100μl×10支)