5’ …PumC(Nn)PumC…3’

*Pu: A or G, mC: 5-hydroxymethylcytosine, 5-methylcytosine, 4-methylcytosine, n=40-2,000

■ 附带试剂

    10X McrBC Buffer 500 μl

    0.1% BSA 1 ml

    100 mM GTP(100 ×) 50 μl

■ 制品说明

McrBC是一种作用于含有甲基胞嘧啶DNA的特异性核酸内切酶，不作用于非甲基化DNA。它能够特异性地识别和切割包含两个(G/A)mC间距在40 bp-2000 bp的DNA序列。(G/A)mC中的甲基化胞嘧啶可以是5-羟甲基胞嘧啶, 5-甲基胞嘧啶或4-甲基胞嘧啶。

■ 起 源

大肠杆菌表达的重组体蛋白质。

■ 反应温度

37℃

■ 活性确认

在50 μl反应液中，37℃下反应1小时，将0.25 μg的含有单一McrBC酶切位点的线型pBR322 (pBR322-mu-BamH I-M Alu I) 完全分解，所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

■ 用途

DNA甲基化位点解析 (qAMP：应用Real Time PCR方法定量解析DNA甲基化位点) 。

富集非甲基化DNA (CHARM：Comprehensive high-throughput arrays for relative methylation, Genome Res. 2008 May;18(5):780-90. Epub 2008 Mar 3.)